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脫氧核糖核酸酶Ⅰ說明
脫氧核糖核酸酶Ⅰ是zui有代表性的核酸內(nèi)切酶。zui早是由M.Kunitz從胰臟中分離出結(jié)晶的，也稱為胰脫氧核糖核酸酶或DNaseⅠ， EC3.1.21.1。分子量約3.1萬，等電點pH4.7，zui適PH 7附近，需要Mg2 和Mn2 。分離單鏈和雙鏈DNA，產(chǎn)生具有 5′-磷酸末端的分解物。在一般條件下其分解產(chǎn)物含有1到8—12個寡聚核苷酸，平均大小等于四個核苷酸。反應(yīng)初期似乎是先分解dpPupPy鍵，但因二價離子的存在對切斷的方式有顯著影響。因此酶容易得到結(jié)晶，所以于核酸的研究上廣泛應(yīng)用;又由于對整個結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確，因而也是酶化學(xué)研究的材料。
脫氧核糖核酸酶Ⅰ
脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途
用于分子生物學(xué)研究。降解DNA的各種酶。這些酶使糖-磷酸酯主鏈上的磷酸二酯鍵水解。此類酶分為兩種：外切核酸酶和內(nèi)切核酸酶。DNAase種類很多，有些為單鏈特異的，有的為雙鏈特異性的，或序列特異性(如限制性內(nèi)切酶)。限制性核酸內(nèi)切酶對特定堿基序列有識別能力，此一特性已用于基因操作技術(shù)中，以構(gòu)建人工克隆。
脫氧核糖核酸酶Ⅰ性狀
為雙鏈特異性內(nèi)切核酸酶，能降解雙鏈DNA成為具有5ˊ-磷酸及3ˊ-OH末端的寡脫氧核糖核苷酸。當(dāng)有一價錳離子存在時，亦能降解單鏈DNA。溶于水，微溶于30%乙醇和丙酮。酶反應(yīng)：脫氧核糖核酸→二核苷酸5′磷酸+寡聚核苷酸5′磷酸zui適pH 7.8。吸光系數(shù)(E1%280)11.1。激活劑為二價金屬離子，zui大激活可以從鎂(Mg2+)+鈣(Ca2+)得到。抑制劑有EDTA和十二烷基硫酸鈉。可加5mmol/L鈣(Ca2+)
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