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大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒操作步驟
【信息說明】
中文名：大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
別名：大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
【性能優(yōu)點】
專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
靈敏度高：由于抗體聯(lián)結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
樣品易保存：經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。
【操作步驟】
1、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2、棄去液體，甩干，每個孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。
3、棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4、每孔加hrp conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
5、棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6、每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。
7、每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8、立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(od值)。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。
9、實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
【注意事項】
1、操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。
2、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
3、濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5、底物請避光保存。
6、試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm
7、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。
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