慢病毒不但可感染分裂或非分裂細胞，還可將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而實現(xiàn)持久表達，又很少引發(fā)機體免疫反應(yīng)。被譽為「細胞實驗首.xuan、體內(nèi)實驗*」工具病毒。
并且作為基因載體在治療各類遺傳性和后天性的人類疾病中倍受歡迎：從基礎(chǔ)研究發(fā)展到臨床階段，高濃度、高感染效率的慢病毒都是感染細胞表達（或沉默）目的基因的理想分子工具。
那么慢病毒在感染細胞中有什么優(yōu)良表現(xiàn)呢？
慢病毒感染細胞的步驟一般是這個樣子的，以「24 孔培養(yǎng)板、貼壁細胞」為例：
Day0: 接種細胞
每孔按 5×104 個待感染細胞鋪板，用含有 10% FBS 的 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng);
Day1: 細胞感染
感染前，根據(jù)說明書用*培養(yǎng)基配置感染液，備用吸掉舊培養(yǎng)基，更換為感染液; 并參考細胞 MOI 值，計算病毒使用量，加入病毒進行感染，混勻;
Day2
病毒感染 8~16 h 后，換回常規(guī)培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng);
Day3~4: 確認感染效果
感染 72 h 后，顯微鏡下觀察感染效果，如 EGFP、Cherry 的表達情況；
如果都這么簡單的話，那你真的是 too young too simple！
那么在慢病毒感染細胞過程中，到底會遇到哪些問題呢？此貼統(tǒng)統(tǒng)幫您搞定~~
難感染問題該如何解決？
對于一些較難轉(zhuǎn)染的細胞，如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等，可以通過添加病毒感染增強液來顯著提高轉(zhuǎn)染效率。
除了難感染外，感染效率低和加入慢病毒后，細胞死亡也是科研的又一攔路虎。
針對加入慢病毒后，細胞死亡很厲害，該如何處理？
這種情況是由于慢病毒對該細胞有一定的毒性作用，需要調(diào)整并降低感染的 MOI 值，并且在感染后 4 小時、8 小時、12 小時對細胞進行觀察，若發(fā)現(xiàn)細胞狀態(tài)變差時，則需要立刻對細胞進行換液操作，使用新鮮的*培養(yǎng)液替換病毒感染培養(yǎng)液。
如何提高慢病毒對細胞的感染效率？
慢病毒對細胞的感染效率受多個因素影響，如細胞自身生長的狀態(tài)，細胞數(shù)量，細胞被慢病毒感染的難易程度等。因此保證細胞正常增殖，輪廓清晰，合適的細胞密度，選擇you的感染條件可以更好的保證感染效率。對于懸浮細胞，可采用離心感染方法，減少病毒感染時的體積，從而提高感染效率。如將細胞培養(yǎng)板密封后，用平角轉(zhuǎn)子離心機 1000 g 離心 1 h，再放回培養(yǎng)箱中正常培養(yǎng)。
