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遠(yuǎn)慕分享培養(yǎng)基制備規(guī)程及使用規(guī)程!
點(diǎn)擊次數(shù):786 更新時(shí)間:2023-02-02

培養(yǎng)基制備規(guī)程

1.目的
規(guī)范本中心微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備工作,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。

2.適用范圍
本規(guī)程適用于使用商品化干粉培養(yǎng)基制備各種待用培養(yǎng)基。

3.職責(zé)
3.1 培養(yǎng)基制備人員負(fù)責(zé)按本規(guī)程制備各類培養(yǎng)基,及時(shí)填寫成品培養(yǎng)基制備記錄,編制培養(yǎng)基目錄,粘貼標(biāo)簽。
3.2 科室負(fù)責(zé)人:負(fù)責(zé)指導(dǎo)、監(jiān)督檢驗(yàn)人員按規(guī)程制備培養(yǎng)基。

4.制備程序

4.1 概述
4.1.1 制備培養(yǎng)基所用的化學(xué)藥品,均為化學(xué)純。有些試劑在使用前應(yīng)先試用。
4.1.2 使用脫水培養(yǎng)基和其他含有有害物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時(shí),應(yīng)遵循良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。
4.1.3 使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如質(zhì)量/體積、PH、制備條件、滅菌條件和操作步驟等。
4.1.4 使用各別成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按配方準(zhǔn)確配制,并記錄所使用成分的特性。
4.1.5 制備培養(yǎng)基常用的容器為玻璃、不銹鋼鋁、鍋或搪瓷容器。不宜使用銅或鐵鍋。培養(yǎng)基中的含銅量過高時(shí)(>0.3mg/1000ml),細(xì)菌不易生長(zhǎng);含鐵量過高時(shí)(>0.14mg/1000ml),則妨礙細(xì)菌毒素的產(chǎn)生。

4.2 水
4.2.1 制備培養(yǎng)基應(yīng)使用蒸餾水或相同質(zhì)量的水,以排除測(cè)試條件下抑制或影響微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)。電阻率在25℃時(shí)應(yīng)≥300000Ω·cm。最好每周檢測(cè)一次。
4.2.2 制備培養(yǎng)基時(shí)避免采用離子交換器生產(chǎn)的去離子水,其微生物含量可能較高,這種水在過濾滅菌后仍可能帶有細(xì)菌生長(zhǎng)的抑制因子。

4.3 稱量和復(fù)水
4.3.1 稱量所需量的脫水培養(yǎng)基(注意緩慢操作,必要時(shí)佩戴口罩或在通風(fēng)柜中操作,以防吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入少量的水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊),然后再加水至所需的量。
4.3.2 必須選擇合適的天平和量筒,以確保稱量和移液的準(zhǔn)確性。

4.4 溶解和分裝
脫水培養(yǎng)基加水后應(yīng)適當(dāng)加熱,并不停攪拌使其快速溶解,必要時(shí),重新溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱前應(yīng)先浸泡幾分鐘。用各別成分制備的培養(yǎng)基應(yīng)將不同成分分別加入適量的水中,并充分溶解,然后再加水至所需的量。

4.5  測(cè)定和調(diào)整PH
4.5.1 用PH計(jì)或精密PH紙測(cè)pH,必要時(shí)進(jìn)行調(diào)整。
4.5.2 在實(shí)驗(yàn)室用各別成分制備的培養(yǎng)基,除特殊說明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),PH的變化不應(yīng)超過0.2個(gè)單位。
4.5.3 一般使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)整培養(yǎng)基的pH。

4.6 分裝
將配制好的培養(yǎng)基根據(jù)使用要求分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?,并及時(shí)密封好。

4.7 滅菌
4.7.1分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)天進(jìn)行滅菌處理(2小時(shí)內(nèi)滅菌最佳)。
4.7.2實(shí)驗(yàn)室采用濕熱滅菌對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理,按照培養(yǎng)基使用說明采用合適的滅菌溫度和時(shí)間。

4.8 保存
制就的培養(yǎng)基不宜保存過長(zhǎng),以少量勤做為宜。培養(yǎng)基存放于暗處和(或)4℃~12℃冰箱的密封袋或平皿筒中可延長(zhǎng)貯存期限。

4.9 制備記錄
培養(yǎng)基制備完畢后,應(yīng)及時(shí)填寫“成品培養(yǎng)基制備記錄"和“成品培養(yǎng)基目錄清單",并在外包裝上貼好相應(yīng)的標(biāo)簽,標(biāo)明名稱,編號(hào),制備日期和有效期等內(nèi)容。

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